現(xiàn)有基于熒光染色的活體單細(xì)胞分選技術(shù)(Fluorescence-Activated Cell Sorting; FACS)一般需要外加熒光標(biāo)記,在單位時(shí)間只能獲得個(gè)別分子所代表的表型,且通常難以直接進(jìn)行“原位”觀測。而基于拉曼顯微光譜技術(shù)的單細(xì)胞分選方法無需外加標(biāo)記,可無損獲得整個(gè)單細(xì)胞的化學(xué)物質(zhì)指紋圖譜,從而迅速識別活體單細(xì)胞的種系發(fā)生、生理特性和代謝產(chǎn)物變化等,因此對于難培養(yǎng)微生物的功能鑒定和資源開發(fā)具有重要意義。
近日,中國科學(xué)院青島生物能源與過程研究所單細(xì)胞研究中心功能基因組團(tuán)隊(duì)助理研究員王允、籍月彤等通過優(yōu)化光路、提高激光強(qiáng)度等方式顯著提高了單細(xì)胞拉曼光譜的采集速度,首次將微生物細(xì)胞拉曼圖譜獲取時(shí)間降低到毫秒級,為高通量單細(xì)胞拉曼分選奠定了基礎(chǔ)。同時(shí),結(jié)合激光誘導(dǎo)向前轉(zhuǎn)移(LIFT)原理,發(fā)明了拉曼激活細(xì)胞彈射(Raman-activated Cell Ejection;RACE)技術(shù),可用于將特定拉曼表型的單細(xì)胞從復(fù)雜微生物群落中分離,從而獲取其基因組信息。這一工作為單細(xì)胞拉曼分選儀(Raman-activated Cell Sorter;RACS)提供了新的一種分選方法。相關(guān)研究成果發(fā)表于最新一期的Analytical Chemistry。
上述研究由英國Sheffield大學(xué)黃巍教授和青島能源所單細(xì)胞研究中心主任徐健研究員合作主持完成。
(單細(xì)胞研究中心供稿)
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Raman activated cell ejection for isolation of single cells, Analytical Chemistry (2013). URL: http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ac403107p.