近日,中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所微型分析儀器研究組研究員關(guān)亞風(fēng)、副研究員耿旭輝團(tuán)隊(duì)在微量樣品中痕量植物激素分析檢測(cè)研究中取得新進(jìn)展。該團(tuán)隊(duì)發(fā)展了一種微型基質(zhì)固相分散(microscale MSPD)萃取的前處理方法,能夠有效地處理亞毫克級(jí)植物樣品,方法簡單、重復(fù)性好且收率高;同時(shí)研發(fā)了一種新型的衍生試劑用于柱前衍生,從而極大地提高了赤霉素的質(zhì)譜檢測(cè)靈敏度。相關(guān)研究成果發(fā)表在美國化學(xué)會(huì)Analytical Chemistry上(DOI:10.1021/acs.analchem.7b02589)。
植物激素是植物體內(nèi)合成的調(diào)控植物生長發(fā)育的信號(hào)分子,準(zhǔn)確檢測(cè)植物體內(nèi)激素的種類和含量對(duì)于深入揭示植物生命現(xiàn)象具有至關(guān)重要的作用。近年來,隨著“植物激素作用的分子機(jī)理”自然科學(xué)基金重大研究計(jì)劃的啟動(dòng),國內(nèi)大批的研究機(jī)構(gòu)投身到植物激素的分析研究中來。但由于某些激素,尤其是赤霉素在植物體內(nèi)的含量極低,而且植物體內(nèi)的代謝物組成非常復(fù)雜,基質(zhì)干擾嚴(yán)重,這就使得樣品前處理過程變得十分繁瑣。加之,激素調(diào)控的信號(hào)傳導(dǎo)和生物化學(xué)過程通常具有組織(或器官)特異性,因此,測(cè)定激素在植物體內(nèi)的時(shí)空分布具有重大意義。解決這一問題的關(guān)鍵在于測(cè)定微量樣品中的痕量植物激素。
大連化物所痕量植物激素分析研究取得新進(jìn)展
該團(tuán)隊(duì)針對(duì)極少量植物樣品(亞毫克級(jí)),發(fā)展了一種新型的micro-scale MSPD方法,這種方法集研磨、浸提、凈化于同一離心管中,不需要任何樣品轉(zhuǎn)移步驟,有效地降低了前處理過程中的損失。同時(shí),針對(duì)赤霉素本身離子化效率低,研發(fā)了一種新型的衍生試劑3-溴丙基三甲基溴化銨(BPTAB),通過化學(xué)衍生后,檢測(cè)靈敏度提高3至4個(gè)數(shù)量級(jí),是目前的最好水平。而且這種衍生試劑具有低毒性,這一性質(zhì)使得其在后續(xù)的研究中具有很好的應(yīng)用潛力。最后,該團(tuán)隊(duì)將此方法運(yùn)用到單片擬南芥葉中赤霉素分布的分析中,實(shí)現(xiàn)其空間分布測(cè)定,空間分辨率達(dá)2X2mm2。此外,該方法對(duì)于其他酸性植物激素的時(shí)空分布測(cè)定也具有適用性。
上述研究工作得到國家自然科學(xué)基金委的資助。